黄病毒属病毒RT-heminested-PCR方法的建立并用于蚊虫检测

作     者：周正斌 朱淮民 张仪 党晨珀 ZHOU Zheng-bin;ZHU Huai-min;ZHANG Yi;DANG Chen-po

作者机构：第二军医大学病原生物教研室上海200433 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025 

基　　金：国家科技重大专项(2012ZX10004-220 2008ZX10004-011)~~ 

出 版 物：《中国人兽共患病学报》 (Chinese Journal of Zoonoses)

年 卷 期：2013年第29卷第7期

页      码：653-658页

摘      要：目的建立适合检测蚊虫携带黄病毒属病毒通用引物反转录半巢式PCR(RT-heminested-PCR)方法。方法根据GenBank黄病毒属病毒非结构蛋白基因(nonstructuralproteins gene)NS5序列,在保守区设计2对(3条)黄病毒属病毒通用引物,以日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)cDNA、登革病毒(Dengue virus,DENV)Ⅰ～Ⅳ型cDNA为模板优化条件建立RT-heminested-PCR方法;以日本脑炎病毒减毒活疫苗(SA14-14-2strain)测定该方法的敏感度,并用于野外采集蚊虫检测。结果在50只淡色库蚊中RT-heminested-PCR方法检测减毒活疫苗JEV最低检出浓度为1×10-2 PFU/mL。用该方法检测云南省普洱市采集的54组(540只)蚊虫,扩增产物经测序确认9组含有乙型脑炎病毒﹑3组含有登革病毒II型﹑1组含有登革病毒I型﹑1组含未报道的黄病毒属病毒,该病毒与Quang Binh virus同源性最高。结论黄病毒属病毒通用引物RT-heminested-PCR方法适合于蚊虫种群黄病毒属病毒监测。其不但适应已知黄病毒属病毒的检测,而且具备检测新型黄病毒属病毒的潜能。

主 题 词：RT—heminested-PCR 蚊虫 黄病毒属病毒 

学科分类：1001[医学-基础医学] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2013.07.003

馆 藏 号：203156502...