禽腺联病毒VP基因在昆虫细胞中的表达

作     者：王安平 朱善元 吴双 王永娟 左伟勇 洪伟鸣 WANG An-ping;ZHU Shan-yuan;WU Shuang;WANG Yong-juan;ZUO Wei-yong;HONG Wei-ming

作者机构：江苏农牧科技职业学院/江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室江苏泰州225300 

基　　金：江苏省自然科学基金项目(BK2011536) 

出 版 物：《江苏农业学报》 (Jiangsu Journal of Agricultural Sciences)

年 卷 期：2014年第30卷第1期

页      码：162-166页

摘      要：为同时在昆虫细胞中按照合适比例表达禽腺联病毒的3个结构蛋白质,首先根据禽腺联病毒VP基因序列设计引物,扩增VP基因,将其克隆至杆状病毒表达载体pFastBac1,获得重组转移载体pFastBac-VP,将其转化到DH10Bac感受态细胞中,经抗性和蓝白斑筛选,获得重组穿梭质粒rBacmid-VP,在脂质体的介导下转染昆虫细胞Sf9,获得重组杆状病毒rBac-VP。SDS-PAGE结果分析表明,3个结构蛋白质VP1、VP2和VP3均获得了表达,分子量正确,且比例为1∶1∶10。Western blot结果显示,表达的重组蛋白质能够与VP3多抗反应。以上结果说明禽腺联病毒的3个结构蛋白质均在昆虫细胞中获得了成功表达。

主 题 词：禽腺联病毒 VP基因 昆虫细胞 表达 

学科分类：09[农学] 0904[农学-动物医学类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-4440.2014.01.028

馆 藏 号：203156539...