添加扩增内标的沙门氏菌PCR检测方法

作     者：杨晋 曾庆梅 张笛 刘坤 王琳 张亚军 Yang Jin;Zeng Qingmei;Zhang Di;Liu Kun;Wang Lin;Zhang Yajun

作者机构：合肥工业大学农产品生物化工教育部工程中心合肥230009 

基　　金：国家自然科学基金项目(31371844 31071556) 国家高科技研究发展计划(2011AA100801) 安徽省科技计划课题(1301032155) 

出 版 物：《生物技术通报》 (Biotechnology Bulletin)

年 卷 期：2014年第30卷第7期

页      码：54-59页

摘      要：通过构建人工扩增内标,建立可以有效指示沙门氏菌检测过程可能出现假阴性情况的PCR检测方法。本研究基于沙门氏菌invA基因设计特异性引物,复合法构建扩增内标,建立PCR检测体系。特异性引物LW,对33株沙门氏菌和6株非沙门氏菌标准株进行检测,结果显示,所有沙门氏菌均扩增出385 bp的目标片段,非沙门氏菌则只能扩增出484 bp的扩增内标片段,特异性良好。灵敏度实验表明,该检测体系的灵敏度可达6.35 fg/μL。人工污染实验表明,起始染菌量为3.2 CFU/25 mL时,仅需8h增菌培养便可检出。大量食品样品检测证明,该检测体系确实可以有效的避免PCR检测过程出现的假阴性,提高检测准确性。

主 题 词：沙门氏菌 PCR检测 扩增内标 假阴性 

学科分类：09[农学] 0903[农学-动物生产类] 

D　O　I：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2014.07.021

馆 藏 号：203156561...