λ-Red重组技术结合复合诱变提高大肠杆菌L-异亮氨酸合成能力

作     者：汪吉鹏 朱滕滕 刘璐 马铖 魏晓博 刘慧燕 方海田 WANG Jipeng;ZHU Tengteng;LIU Lu;MA Cheng;WEI Xiaobo;LIU Huiyan;FANG Haitian

作者机构：宁夏大学食品科学与工程学院宁夏食品微生物应用技术与安全控制重点实验室宁夏银川750021 宁夏三十六度生物科技有限公司宁夏银川750021 

基　　金：宁夏自然科学基金项目(2020AAC03100) 银川市科技计划项目(2023NYHZC01,2024NYHZC002) 

出 版 物：《食品工业科技》 (Science and Technology of Food Industry)

年 卷 期：2025年第46卷第2期

页      码：167-174页

摘      要：本研究旨在通过λ-Red重组技术结合复合诱变方法提高大肠杆菌L-异亮氨酸合成能力。以E. coli NXA为出发菌株,首先采用λ-Red同源重组敲除编码支链氨基酸转运蛋白基因brnQ,获得突变菌株E. coli NXA1。然后将E. coli NXA1经常温常压等离子体(ARTP)、紫外(UV)与亚硝基胍(NTG)多轮复合诱变,以α-氨基丁酸(α-AB)为结构类似物进行筛选,筛选得到突变菌株E. coli NXA2。摇瓶发酵结果表明,在37℃、200 r/min条件下发酵40 h后,E. coli NXA1的L-异亮氨酸滴度为2.76 g/L,较E. coli NXA提高了33.98%;E. coli NXA2的L-异亮氨酸滴度为3.22 g/L,较E. coli NXA1提高了16.67%,较E. coli NXA提高了56.31%。对菌株E. coli NXA2经连续传代20代后,表现出较好的遗传稳定性。λ-Red重组技术结合复合诱变对大肠杆菌提高L-异亮氨酸合成能力有明显效果,为选育L-异亮氨酸高产菌株奠定理论基础。

主 题 词：大肠杆菌 λ-Red重组技术 brnQ基因 复合诱变 发酵 L-异亮氨酸 

学科分类：081703[081703] 08[工学] 0817[工学-轻工类] 0836[0836] 082203[082203] 0822[工学-核工程类] 

核心收录：

D　O　I：10.13386/j.issn1002-0306.2024020234

馆 藏 号：203156577...