转基因玉米浙大瑞丰8特异性定性PCR检测方法研究

作     者：田锦 张月秋 张华 陈子言 田璐 王颢潜 高芳瑞 梁晋刚 陈红 TIAN Jin;ZHANG Yue-qiu;ZHANG Hua;CHEN Zi-yan;TIAN Lu;WANG Hao-qian;GAO Fang-rui;LIANG Jin-gang;CHEN Hong

作者机构：农业农村部科技发展中心北京100176 北京农业职业学院北京102442 

基　　金：农业农村部农业国家和行业标准制修订项目(农质标函〔2022〕66号) 科技创新2030-重大项目(2022ZD0401909) 农业科研杰出人才培养计划(2021年) 

出 版 物：《生物技术通报》 (Biotechnology Bulletin)

年 卷 期：2024年第40卷第12期

页      码：45-52页

摘      要：【目的】浙大瑞丰8是杭州瑞丰生物科技有限公司开发的抗虫转基因玉米,于2021年12月获得生产应用安全证书。研究浙大瑞丰8的特异性PCR检测方法,为市场监管和产业化推广提供技术支持。【方法】以浙大瑞丰8转化体外源基因插入端侧翼序列为靶标,在5 端(右侧翼)和3 端(左侧翼)分别设计特异性引物,以与玉米内标准基因zSSIIb一致的标准反应体系和反应程序,对左侧翼和右侧翼各20对引物进行了筛选,得到了特异性高、稳定性好的候选引物,通过改变退火温度和引物浓度这两个关键参数,初步建立了浙大瑞丰8转化体PCR检测方法。【结果】筛选到的浙大瑞丰8 PCR扩增引物RF 8-RB-R4/F1可特异性扩增目标片段265 bp,建立了与玉米内标准基因zSSIIb一致的标准反应体系和反应程序,实现了批量检测的高通量。【结论】建立的特异性定性PCR检测方法稳定性及适应性好,对拷贝数分数为0.1%(约20个拷贝)能稳定检出,可精准、特异地检测出浙大瑞丰8转化体。

主 题 词：转基因玉米 浙大瑞丰8 定性PCR技术 特异性检测 

学科分类：09[农学] 0901[农学-植物生产类] 

核心收录：

D　O　I：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2024-0324

馆 藏 号：203156697...