毛蕊花糖苷促进神经递质乙酰胆碱释放的分子机制

作     者：周志华 邢海燕 梁彦 高杰 刘洋 张婷 朱莉 钱嘉隆 周川 李刚 ZHOU Zhi-hua;XING Hai-yan;LIANG Yan;GAO Jie;LIU Yang;ZHANG Ting;ZHU Li;QIAN Jia-long;ZHOU Chuan;LI Gang

作者机构：内蒙古医科大学内蒙古呼和浩特010110 内蒙古自治区人民医院药学处内蒙古呼和浩特010017 

基　　金：国家自然科学基金项目(82260777) 内蒙古自治区蒙医药协同创新中心科学研究项目(MYYXTZD202102) 内蒙古自治区高等学校科学研究项目(NJZY22613) 

出 版 物：《中国中药杂志》 (China Journal of Chinese Materia Medica)

年 卷 期：2025年第50卷第2期

页      码：335-345页

摘      要：研究毛蕊花糖苷(verbascoside,OC1)促进阿尔茨海默病(Alzheimer s disease,AD)发病过程中乙酰胆碱(acetylcholine,ACh)释放的分子机制。使用β-淀粉样蛋白(1~42)(Aβ_(1-42))诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12)作为AD体外模型,分为对照组(control),模型组(model,Aβ_(1-42)10μmol·L^(-1)),OC1处理组(2、10μg·mL^(-1))。通过全蛋白磷酸化修饰定量组学分析OC1对AD细胞模型磷酸化蛋白的影响,结合计算机辅助药物设计虚拟筛选OC1对于钙通道亚型的选择性,荧光探针Fluo-3/AM检测细胞中Ca^(2+)浓度,Western blot检测OC1对磷酸化钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(p-CaMKⅡ,Thr286)及突触囊泡相关蛋白表达的影响,UPLC/Q Exactive MS检测OC1对AD细胞模型ACh释放的影响,试剂盒检测OC1对AD细胞模型中乙酰胆碱酯酶(acetylcholine esterase,AChE)活力的影响。结果显示,模型组与OC1处理组的差异修饰蛋白在GO分类、KEGG通路和蛋白结构域3个层面均与钙通道激活相关。分子对接结果揭示了L-型钙通道的主导作用。在Ca^(2+)螯合剂EGTA(乙二醇四乙酸)、L-型钙通道阻断剂维拉帕米(verapamil)和N-型钙通道阻断剂芋螺毒素(conotoxin)存在的条件下,OC1对Fluo-3/AM荧光强度的增强作用被削弱,且verapamil的作用强于conotoxin。这证实OC1主要通过与L-型钙通道蛋白相互作用促进细胞外Ca^(2+)内流。蛋白质组学分析和Western blot结果表明,OC1处理后p-CaMKⅡ及下游囊泡相关蛋白表达上调,说明OC1通过激活CaMKⅡ作用于囊泡相关蛋白,参与神经突触的重塑和递质释放,从而影响学习记忆。此外,OC1还降低了AChE活力,延长ACh在突触间隙的作用时间。

主 题 词：毛蕊花糖苷 阿尔茨海默病 钙离子 囊泡蛋白 乙酰胆碱 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.19540/j.cnki.cjcmm.20240802.702

馆 藏 号：203156924...