不同抗原表位的cTnⅠ单克隆抗体对cTnⅠ-TnC复合物亲和性的研究

作     者：何成山 刘洋 刘路遥 吴豫 陆志成 HE Chengshan;LIU Yang;LIU Luyao;WU Yu;LU Zhicheng

作者机构：上海中医药大学附属第七人民医院医学检验科上海200137 中国人民解放军联勤保障部队第九〇八医院检验输血科南昌330002 

基　　金：上海市浦东新区公共卫生学科:预防医学与检验学(PWGw2020-02) 上海市卫生健康委员会面上项目(202040165) 

出 版 物：《中国免疫学杂志》 (Chinese Journal of Immunology)

年 卷 期：2025年第41卷第1期

页      码：189-194页

摘      要：目的:了解不同心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)抗原表位的单克隆抗体(MAb)对cTnⅠ-肌钙蛋白C(cTnⅠ-TnC)抗原的亲和性,筛选新型cTnⅠ特异性抗体用于临床检测试剂盒研发。方法:基于微阵列化学发光免疫分析技术平台,采用cTnⅠ-TnC抗原点样硬基质芯片,以鼠源性cTnⅠMAb为待检抗体,HRP-羊抗鼠IgG为检测抗体,对抗原点样液、抗原点样浓度、待检抗体浓度进行实验条件优化;采用竞争法检测不同抗原表位的cTnⅠMAb对cTnⅠ-TnC的亲和力,实验组为加入梯度浓度的cTnⅠ-TnC,对照组加入等体积稀释液,检测不同cTnⅠMAb的反应信号,计算亲和常数。结果:最优实验条件:抗原点样液为P105,抗原点样浓度为0.1 mg/ml,待检抗体浓度为80 ng/ml;包含TnC抗体的20c6cc和7B9cc MAb亲和性最好,其中20c6cc MAb达3.18×10^(6) L/mol;cTnⅠMAb中位于肽链C端的a.a.r 130~145、169~178和190~196区域的cTnⅠMAb表现出较好的亲和力,其中MAb 625(a.a.r 169~178)为6.37×10^(5) L/mol,在cTnⅠMAb中亲和性最强。结论:cTnⅠ肽链C端a.a.r 130~145、169~178、190~196和TnC区的MAb与cTnⅠ-TnC抗原的亲和性较好,针对该区域设计新型cTnⅠ补位抗体,可作为解决自身抗体及肽链蛋白水解负性干扰的新思路。

主 题 词：心肌肌钙蛋白Ⅰ 肌钙蛋白C 单克隆抗体 亲和性 

学科分类：1010[医学-医学技术类] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-484X.2025.01.028

馆 藏 号：203157136...