HGF基因真核表达质粒的构建及其细胞表达

作     者：徐莲 舒雄 常志静 刘文娟 王雪 周立军 XU Lian;SHU Xiong;CHANG Zhi-jing;LIU Wen-juan;WANG Xue;ZHOU Li-jun

作者机构：天津大学 天津市现代药物传递及功能高效化重点实验室天津300072 

基　　金：天津市应用基础及前沿技术研究计划(11JCZDJC16300) 

出 版 物：《现代生物医学进展》 (Progress in Modern Biomedicine)

年 卷 期：2015年第15卷第1期

页      码：21-24页

摘      要：目的:构建真核表达质粒p EGFP-N1-HGF并观察干细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)在人皮肤成纤维中的表达。方法:从扩增人的间充质干细胞中提取全长RNA为模板,设计合成引物,用RT-PCR法扩增出HGF基因片段,然后将HGF基因片段连接于真核表达质粒p EGFP-N1中。双酶切鉴定及测序分析后,用脂质体包裹转染体外培养的人的皮肤成纤维细胞,通过荧光显微镜观察其转染效果,酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测HGF蛋白的表达。结果:经酶切鉴定及测序验证p EGFP-N1-HGF构建正确,经转染的人皮肤纤维细胞中观察到较强的绿色荧光并且可以表达一定量的HGF。结论:成功构建了真核表达质粒p EGFP-N1-HGF,为基因治疗脱发疾病提供实验基础。

主 题 词：HGF 转染 成纤维细胞 真核表达质粒 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.13241/j.cnki.pmb.2015.01.006

馆 藏 号：203157210...