蜂蜜中嗜渗酵母菌TaqMan实时荧光定量PCR方法的建立

作     者：姜玲玲 罗文菊 雷露 周景瑞 艾蓉 余波 JIANG Lingling;LUO Wenju;LEI Lu;ZHOU Jingrui;AI Rong;YU Bo

作者机构：贵州省畜牧兽医研究所贵州贵阳550005 

基　　金：贵州省科技支撑计划项目“贵州黄花梨蜂蜜产品溯源和加工质量控制技术的研究”(黔科合支撑﹝2022﹞一般161) 

出 版 物：《贵州农业科学》 (Guizhou Agricultural Sciences)

年 卷 期：2025年第53卷第1期

页      码：70-75页

摘      要：【目的】建立蜂蜜中嗜渗酵母菌的快速检测方法,为保障蜂蜜品质提供理论基础。【方法】根据GenBank中嗜渗酵母菌26S rDNA D_(1)~D_(2)基因序列设计特异性引物,PCR扩增获得嗜渗酵母D_(1)~D_(2)基因片段,构建重组质粒pMD-18T-JM为阳性标准品,对荧光定量PCR反应条件进行优化,建立嗜渗酵母菌TaqMan探针实时荧光定量PCR方法,并对160份蜂蜜样品进行验证。【结果】建立的蜂蜜中嗜渗酵母菌TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法特异性好,灵敏度达0.004 pg/μL。TaqMan实时荧光定量PCR检测阳性率达98.5%,比普通PCR检测(阳性率84.1%)高14.4百分点,检测敏感性达100%。【结论】嗜渗酵母菌TaqMan探针实时荧光定量PCR方法特异、灵敏、快速、重复性好,适合于蜂蜜中嗜渗酵母菌的快速检测。

主 题 词：蜂蜜 嗜渗酵母菌 探针 荧光定量 PCR 

学科分类：0832[0832] 08[工学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1001-3601.2025.01.009

馆 藏 号：203157247...