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嗜水气单胞菌纳米PCR检测方法的建立

嗜水气单胞菌纳米PCR检测方法的建立

作     者:韩雅静 赵奇 石有权 安瑞 赵云萍 史秋梅 吴同垒 高桂生 HAN Yajing;ZHAO Qi;SHI Youquan;AN Rui;ZHAO Yunping;SHI Qiumei;WU Tonglei;GAO Guisheng

作者机构:河北省预防兽医学重点实验室河北秦皇岛066004 滦州市农业农村局河北唐山063700 迁西县农业农村局河北唐山064300 

基  金:河北省科技厅循环养殖鱼类技术的应用与示范(202867012) 河北省第三期现代农业产业技术体系技术河北省创新团队建设项目(HBCT2023220207) 

出 版 物:《中国兽医杂志》 (Chinese Journal of Veterinary Medicine)

年 卷 期:2025年第61卷第2期

页      码:47-51页

摘      要:为了快速检测水生动物的嗜水气单胞菌(***)感染,本试验根据嗜水气单胞菌溶血素hlyA基因序列设计引物,通过对退火温度和引物体积的优化,建立了嗜水气单胞菌的纳米聚合酶链式反应(Nano-PCR)检测方法,分析其敏感性、特异性和临床样本检测结果,并与普通聚合酶链式反应(PCR)方法进行比较。结果显示,优化建立的纳米PCR方法成功扩增出约280 bp的嗜水气单胞菌特异性条带;最小检测浓度为1.61 pg,敏感性是普通PCR(最小检测浓度为16.1 pg)的10倍;纳米PCR和普通PCR方法对创伤弧菌(***)、迟缓爱德华菌(***)和维氏气单胞菌(***)均无扩增;对18份病料的阳性检出率为72%,与普通PCR结果一致。结果表明,本试验建立的检测嗜水气单胞菌的纳米PCR方法较普通PCR方法具有更高的敏感性和特异性,为水生动物嗜水气单胞菌感染的鉴别诊断和防治提供了技术支持。

主 题 词:嗜水气单胞菌 纳米PCR hlyA 临床检测 

学科分类:090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D O I:10.20157/j.cnki.zgsyzz.2025.02.007

馆 藏 号:203157291...

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