广藿香Trihelix家族PatASIL2基因克隆、亚细胞定位及表达分析

作     者：李俊仁 陈秀珍 吴带娣 LI Junren;CHEN Xiuzhen;WU Daidi

作者机构：广州医科大学附属肿瘤医院广东广州510095 仲恺农业工程学院农业与生物学院广东广州510225 广州中医药大学中药学院广东广州510006 

基　　金：广东省基础与应用基础研究基金项目(2022A1515110525,2021A1515110147) 广州市卫生健康科技项目(20232A011015) 广州市科技计划项目(2023A04J0600) 

出 版 物：《华北农学报》 (Acta Agriculturae Boreali-Sinica)

年 卷 期：2025年第40卷第1期

页      码：104-112页

摘      要：为探究广藿香Trihelix家族基因PatASIL2的序列特征、亚细胞定位及表达模式,以广藿香转录组获得的ASIL2基因序列设计特异性引物,以广藿香cDNA为模板,克隆PatASIL2基因,随后对其进行生物信息学分析;构建PatASIL2-EGFP融合蛋白表达载体并转化拟南芥原生质体,检测PatASIL2的亚细胞定位;利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析PatASIL2基因在广藿香不同组织、外源茉莉酸甲酯(MeJA)喷施及非生物胁迫(盐胁迫、干旱胁迫、冷胁迫)下的表达情况。结果显示,PatASIL2含长度为1 035 bp的开放阅读框,编码344个氨基酸。PatASIL2不具有跨膜结构和信号肽,属于不稳定的亲水蛋白,含有41个丝氨酸磷酸化位点和1个Myb_DNA-bind_4保守结构域。系统进化分析显示,PatASIL2归类到Trihelix转录因子家族的SIP1亚家族,与芝麻SiASIL2同源性较高。亚细胞定位结果表明,PatASIL2为细胞核定位蛋白。qRT-PCR结果表明,PatASIL2在广藿香的嫩叶、成熟叶、老叶、根和茎中都有表达,尤其在老叶中的表达量最高;在MeJA处理后,PatASIL2基因的表达量在12~24 h显著升高;盐胁迫下,PatASIL2基因的表达量在3~24 h显著升高;在干旱胁迫下,PatASIL2基因的表达量在24 h显著升高;在冷胁迫下,PatASIL2基因在12 h表达量显著升高。

主 题 词：广藿香 Trihelix ASIL2 基因克隆 表达模式 亚细胞定位 

学科分类：1008[医学-中药学类] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.7668/hbnxb.20195335

馆 藏 号：203157616...