圆圈病毒人源1型实时荧光RAA快速检测方法的建立

作     者：余丹 赵俊柯 尹文巧 张艳芳 李小凤 吴嫒琼 谢志勤 喻华英 谢芝勋 YU Dan;ZHAO Junke;YIN Wenqiao;ZHANG Yanfang;LI Xiaofeng;WU Aiqiong;XIE Zhiqin;YU Huaying;XIE Zhixun

作者机构：广西大学动物科学技术学院广西南宁530004 广西壮族自治区兽医研究所农业农村部中国(广西)-东盟跨境动物疫病防控重点实验室广西兽医生物技术重点实验室广西南宁530001 

基　　金：广西科技基地和人才专项(桂科AD17195083) 广西兽医生物技术重点实验室自主研究项目(24-035-32-A-01) 广西八桂学者专项(2019A50) 

出 版 物：《中国家禽》 (China Poultry)

年 卷 期：2025年第47卷第3期

页      码：85-92页

摘      要：研究旨在建立一种快速检测圆圈病毒人源1型(GyH1)的方法。试验通过比对GenBank中GyH1基因组序列,基于序列保守区设计特异性引物和探针,经过筛选和优化,建立GyH1实时荧光重组酶介导核酸等温扩增(RAA)检测方法。结果显示:建立的实时荧光RAA方法可在20 min内鉴定GyH1;该方法特异性强,与圆圈病毒禽源1型(GyVg1)、鸡传染性贫血病毒(CIAV)、血清4型禽腺病毒(FAdV-4)、H9亚型禽流感病毒(H9 AIV)、新城疫病毒(NDV)、禽传染性支气管炎病毒(IBV)、传染性法氏囊病病毒(IBDV)、鸡细小病毒(ChPV)、J亚群禽白血病病毒(ALV-J)、鸡毒支原体(MG)、禽滑液囊支原体(MS)无交叉反应;敏感性高,筛出的引物探针可有效扩增,优化反应条件后检测限可达10~2拷贝/μL;重复性好,批内和批间变异系数均小于4%。采用该方法与荧光定量PCR方法同时对231份样品进行检测,两者检测结果相符。研究表明,成功建立了实时荧光RAA方法,可用于GyH1的鉴别检测,为基层快速检测GyH1提供了新的技术手段。

主 题 词：圆圈病毒人源1型 重组酶介导核酸等温扩增 快速检测 即时检测 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16372/j.issn.1004-6364.2025.03.011

馆 藏 号：203157627...