鸭疫里默氏菌甲羟戊酸激酶基因的重组表达与免疫保护效果研究

作     者：吕敏娜 覃宗华 袁建峰 孙铭飞 余劲术 吴彩艳 蔡建平 L(U) Min-na;QIN Zong-hua;YUAN Jian-feng;SUN Ming-fei;YU Jin-shu;WU Cai-yan;CAI Jian-ping

作者机构：广东省农业科学院兽医研究所广东省兽医公共卫生实验室广州510640 

基　　金：广东省科技攻关重点项目(2006A20301002) 广东省自然科学基金(06025374) 

出 版 物：《畜牧兽医学报》 (ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA)

年 卷 期：2010年第41卷第8期

页      码：1006-1011页

摘      要：在从鸭疫里默氏菌(RA)基因组文库筛选毒力基因的过程中,作者获得了编码RA甲羟戊酸激酶的基因(RAMVA),将该基因片段提交GenBank,收录号为GQ398751。测序分析结果显示其开放阅读框长492 bp,共编码163个氨基酸。根据序列信息设计引物,用PCR方法从RA中扩增出RAMVA的编码区并与表达质粒pMAL-C2X连接,构建重组质粒pMAL-RAMVA。经限制性酶切和序列测序鉴定序列正确无误后将pMAL-RAMVA转化至***21(DE3)构建重组表达菌***21/pMAL-C2X-RAMVA。用IPTG诱导重组菌成功诱导RAMVA的表达,通过SDS-PAGE分析表达产物,表达量占全菌总蛋白的15.6%,且重组表达的甲羟戊酸激酶在大肠杆菌中表达时以可溶性状态存在。雏鸭免疫试验表明,接种重组表达菌***21/pMAL-C2X-RAMVA2周后,可产生对RA致死量攻击达42.3%的免疫保护率。

主 题 词：鸭疫里默氏菌 甲羟戊酸激酶 表达 免疫保护 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

馆 藏 号：203157642...