在昆虫细胞中表达HSV糖蛋白单域抗体的重组杆状病毒的构建

作     者：喻启桂 秦克锋 刘军连 汪美先 姜绍谆 马文煜 

作者机构：第四军医大学微生物学教研室西安710032 

出 版 物：《中华微生物学和免疫学杂志》 (Chinese Journal of Microbiology and Immunology)

年 卷 期：1995年第15卷第3期

页      码：153-157页

摘      要：设计一对含EcoRⅠ—起始码和终止码—SalⅠ的鼠抗体V_H引物,用PCR法对重组质粒p1A12V_H中插入基因1A12V_H进行突变,突变的PCR产物的序列测定表明,在1A12V_H基因两端成功地插入了EcoRⅠ—起始码和终止码—SalⅠ。将突变后1A12V_H依次克隆入pSL301质粒和pAcEEUL8质粒中,使ⅠA12V_H基因两端均接上BamHⅠ接头,用BanHⅠ酶切,将1A12V_H基因克隆入杆状病毒表达载体pAcCL29质粒的多角体基因中的唯一BamHⅠ切点处,经计算机分析,用BamHI;EcoRV/EcoRⅠ;SalⅠ三组酶切,筛选出克隆的1A12V_H基因方向与多角体启动子基因方向一致的重组杆状病毒转基因质粒pAc1A12V_H。CsCL—EB梯度平衡离心法纯化pAc1A12V_H,转化AcNPV基因组DNA,然后转染的sf9细胞,空斑筛选和纯化1A12V_H—AcNPV重组杆状病毒,并用PCR法作进一步鉴定。

主 题 词：单纯疱疹病毒 糖蛋白 杆状病毒 重链可变区 克隆 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3760/cma.j.issn.0254-5101.1995.03.102

馆 藏 号：203157721...