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哈维氏弧菌FlaA基因的克隆、序列分析及真核表达质粒的构建

哈维氏弧菌FlaA基因的克隆、序列分析及真核表达质粒的构建

作     者:庄轩 覃映雪 苏永全 王军 丁少雄 ZHUANG Xuan;QIN Ying-xue;SU Yong-quan;WANG Jun;DING Shao-xiong

作者机构:厦门大学海洋与环境学院福建厦门361005 

基  金:国家863项目(2003AA603011) 福建省重大科技项目(2002N009) 

出 版 物:《海洋学报》 (ACTA OCEANOLOGICA SINICA)

年 卷 期:2007年第29卷第6期

页      码:74-79页

摘      要:哈维氏弧菌是水产病害中常见的致病菌.参照基因库上登录的弧菌鞭毛丝蛋白FlaA基因序列设计简并引物,PCR扩增哈维氏弧菌TS-628株的FlaA全基因,并克隆到pMD 18-T载体中测序,经序列分析该基因全长1 140 bp,编码379个氨基酸.与基因库中其他弧菌的同源基因序列比较显示,哈氏弧菌FlaA基因与霍乱弧菌FlaA基因的同源性最高(79.5%),该基因编码的多肽缺乏半胱氨酸,并在N-,C-两端的氨基酸序列较为保守,中间区域的变异较大.对该蛋白的氨基酸组成及空间结构进行了分析和预测,并推测该蛋白质的平均分子量为40.6 kDa.在该基因末端加上一段编码Flag短肽的核苷酸序列后克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+),获得带哈氏弧菌鞭毛丝蛋白FlaA基因的真核表达重组质粒pcDNA-FlaA-tag,为其DNA疫苗的进一步研究奠定了基础.

主 题 词:哈维氏弧菌 FlaA基因 基因克隆 序列分析 真核表达重组质粒 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 071010[071010] 07[理学] 0906[农学-水产类] 09[农学] 

核心收录:

D O I:10.3321/j.issn:0253-4193.2007.06.011

馆 藏 号:203157797...

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