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巢式甲基化特异性PCR检测不同类型组织标本中WIF-1基因启动子异常甲基化

巢式甲基化特异性PCR检测不同类型组织标本中WIF-1基因启动子异常甲基化

作     者:徐新娟 丁文柏 

作者机构:三峡大学第一临床医学院呼吸内科宜昌443003 

出 版 物:《实用医学进修杂志》 (Journal of Practical Training of Medicine)

年 卷 期:2008年第36卷第1期

页      码:34-38页

摘      要:目的:采用一种高灵敏度的DNA甲基化分析方法,即巢式甲基化特异性PCR法(nested—MSP,nMSP),检测外科手术切除新鲜组织、石蜡包埋组织及纤维支气管镜活检组织中WIF-1基因启动子的异常甲基化状态。方法:将基因组DNA变性成为单链,用亚硫酸氢盐修饰单链DNA,所有未甲基化的胞嘧啶被转变为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶则不变。设计针对甲基化和非甲基化等位基因的特异引物,进行巢式PCR扩增,最后经凝胶电泳检测目的片段。结果:在3种类型的原发性非小细胞肺癌标本中都检测出了WIF-1基因启动子的异常甲基化。结论:巢式甲基化特异性PCR是一种灵敏度高、特异性强的甲基化检测方法,可广泛应用于不同类型标本基因启动子甲基化的分析。

主 题 词:巢式甲基化特异性PCR(nMSP) WIF-1 基因 甲基化 

学科分类:1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

馆 藏 号:203157803...

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