牛冠状病毒N基因的原核表达和多克隆抗体的制备

作     者：刘文锴 曹兴旺 汪萍 金映红 薛晶 李月 梁纤纤 李晓卓 韩翔舒 郑启铭 蒋松 夏俊 LIU Wen-kai;CAO Xing-wang;WANG Ping;JIN Ying-hong;XUE Jing;LI Yue;LIANG Xian-xian;LI Xiao-zhuo;HAN Xiang-shu;ZHENG Qi-ming;JIANG Song;XIA Jun

作者机构：石河子大学动物科技学院新疆石河子832061 新疆畜牧科学院兽医研究所新疆乌鲁木齐830000 农业农村部草食动物疫病防控重点实验室新疆乌鲁木齐830000 新疆动物疫病研究重点实验室新疆乌鲁木齐830000 新疆农业大学动物医学学院新疆乌鲁木齐830000 

基　　金：天山英才-青年科技拔尖人才项目(2022TSYCCX0046) 新疆重大专项(2023A02007) 国家级大学生创新创业项目(202310759012) 

出 版 物：《动物医学进展》 (Progress In Veterinary Medicine)

年 卷 期：2025年第46卷第3期

页      码：23-27页

摘      要：为制备牛冠状病毒N蛋白多克隆抗体,建立简单快捷的牛冠状病毒检测方法。根据牛冠状病毒N基因序列设计引物,将N基因重组至PET-30a载体上,经PCR及测序鉴定重组载体构建成功;将构建的PET-30a-N重组质粒转入大肠埃希氏菌DH5-α和Rosetta(DE3)感受态细胞,进行扩增和诱导表达,后经超声破碎后获取N蛋白并进行蛋白纯化;最后将纯化后的N蛋白与弗氏佐剂乳化后免疫新西兰白兔,共制得35 mL抗N蛋白多克隆抗体血清,经Western blot和IFA鉴定,抗N蛋白多克隆抗体有良好的特异性,试验制备的抗N蛋白牛冠状病毒多克隆抗体可用于牛冠状病毒的检测。

主 题 词：牛冠状病毒 N蛋白 多克隆抗体 原核表达 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16437/j.cnki.1007-5038.2025.03.026

馆 藏 号：203157965...