当归DXR基因保守区克隆和组织特异性表达分析

作     者：雒军 王引权 温随超 张金林 夏琦 LUO Jun;WANG Yin-quan;WEN Sui-chao;ZHANG Jin-lin;XIA Qi

作者机构：甘肃中医学院甘肃兰州730000 甘肃省高校中(藏)药化学与质量研究省级重点实验室甘肃兰州730000 兰州大学草地农业科技学院甘肃兰州730020 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(81060327 81260616) 

出 版 物：《中草药》 (Chinese Traditional and Herbal Drugs)

年 卷 期：2014年第45卷第13期

页      码：1907-1913页

摘      要：目的克隆当归Angelica sinensis 1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶(DXR)编码基因部分保守区序列,分析DXR基因在当归根、茎、叶中的特异性表达。方法根据已克隆的植物DXR保守序列设计一对简并引物,以当归叶片总RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增出DXR片段并连接到pGEM-T Easy载体上,转化大肠杆菌菌株Escherichia coli DH5α,阳性克隆经PCR检测后测序。运用RT-qPCR方法,以当归肌动蛋白基因Actin为内参基因,检测DXR在当归不同组织中的表达量。结果得到一段564 bp的DXR基因序列,并在GenBank注册(登录号:KJ000259)。序列分析表明,该片段编码187个氨基酸,与GenBank中注册的海岛棉Gossypium barbadense等6个物种的DXR核苷酸序列同源性和氨基酸序列同源性均在80%以上;DXR在叶中表达量最高,相对表达量分别是茎和根组织中的2.5倍和3.2倍(P<0.01)。结论本研究首次从当归中克隆出了DXR部分保守区序列,并揭示了DXR在不同组织中的差异表达,为有效利用该基因奠定前期工作基础。

主 题 词：当归 1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶 克隆 肌动蛋白 RT-PCR 

学科分类：1008[医学-中药学类] 1006[医学-中西医结合类] 100602[100602] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.7501/j.issn.0253-2670.2014.13.019

馆 藏 号：203157997...