C端带His标签重组ScFv真核表达载体的构建及鉴定

作     者：赖德华 沈粤春 赵超尘 吴阳 王晓明 李君 LAI Dehua;SHEN Yue-chun;ZHAO Chao-chen;WU Yang;WANG Xiao-ming;LI Jun

作者机构：广州医科大学附属第一医院肝胆外科广东广州510120 广州医科大学附属第一医院心内科广东广州510120 

基　　金：广州市卫生局项目(20121A011140) 广州市科技计划项目(2009J1-C371-1) 

出 版 物：《广州医学院学报》 (Academic Journal of Guangzhou Medical College)

年 卷 期：2013年第41卷第5期

页      码：13-16页

摘      要：目的:构建表达抗p185且含His标签的ScFv的真核表达载体。方法:通过PCR自pcDNAH520C9ScFv-hIL-2质粒中获得H520C9ScFv片段,将此片段插入真核表达质粒pcDNA3.1(+)中;设计引物在ScFv片段C端增加His标签和凝血酶识别序列,再与质粒pcDNA3.1(+)连接,将所得的融合基因进行限制性内切酶EcoR I、HindⅢ双酶切及琼脂糖凝胶电泳鉴定,并测定目的序列。结果:成功将H5200C9ScFv片段、His标签和凝血酶识别序列插入真核表达质粒pcDNA3.1(+)中。结论:成功构建了真核表达载体pcDNA3.1-His-ScFv,为下一步在真核细胞中表达和纯化抗p185单抗奠定基础。

主 题 词：载体构建 His标签 融合基因 乳腺肿瘤 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1008-1836.2013.05.004

馆 藏 号：203158072...