利用试剂盒快速检测苹果锈果类病毒的研究

作     者：陈红霞 乔雪华 邵建柱 孙建设 Chen Hongxia;Qiao Xuehua;Shao Jianzhu;Sun Jianshe

作者机构：河北农业大学园艺学院河北保定071000 

基　　金：现代农业产业技术体系专项资金项目"砧木评价与利用"(CARS-28) 

出 版 物：《中国农学通报》 (Chinese Agricultural Science Bulletin)

年 卷 期：2012年第28卷第19期

页      码：254-259页

摘      要：为简化苹果锈果类病毒(apple skin scar viroid,ASSVd)的常规RT-PCR检测步骤,找到更为快速准确的检测方法,以感染ASSVd的田间苹果枝条为试验材料,根据基因库中ASSVd的基因序列设计合成特异性引物,选用国产试剂盒,对RT-PCR体系进行优化。结果表明,总RNA和反转录产物的用量分别为37.4～74.8ng、1.0～3.0μL,退火温度为63.8℃,可以获得良好的两步RT-PCR扩增;而总RNA用量为3.74～7.48ng、退火温度在50.1～62.6℃范围内时,一步RT-PCR的扩增效果较好。采用优化的RT-PCR检测体系对山东采集的样品进行检测,2种检测体系的检测结果完全一致。研究建立的两步和一步RT-PCR优化体系为ASSVd的批量快速检测奠定了基础。

主 题 词：苹果锈果类病毒 两步RT-PCR 一步RT-PCR 

学科分类：09[农学] 0902[农学-自然保护与环境生态类] 090201[090201] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-6850.2012.19.049

馆 藏 号：203158248...