籼稻姊妹染色单体粘着蛋白OsRad21-i基因的原核表达载体构建与表达

作     者：康海岐 申国安 杨金水 程在全 KANG Haiqi;SHEN Guoan;YANG Jinshui;CHENG Zaiquan

作者机构：中国科学院昆明植物研究所云南昆明650204 四川省农业科学院作物研究所四川成都610066 复旦大学遗传研究所上海200433 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30660090) 四川省财政育种专项资助项目(2006YZGG04-009) 四川省农科院青年基金资助项目 

出 版 物：《中山大学学报（自然科学版）》 (Acta Scientiarum Naturalium Universitatis Sunyatseni)

年 卷 期：2009年第48卷第1期

页      码：62-66页

摘      要：以杂交水稻汕优63的根组织cDNA为模板，采用引物设计引入酶切位点和RT—PCR方法，扩增出了籼稻姊妹染色单体粘着基因OsRad21-i（AY318757）开放阅读框（ORF），命名为Eqfr，两端分别带有BamHI和Sal Ⅰ限制性位点。然后克隆到pGEM—T载体，将重组克隆载体pGEM—T—Eqfr与表达载体pQE30分别同时进行BamHI和SalⅠ双酶切，连接酶切后的Eqfr和pQE30，并转化DH5α感受态细胞，获得了DH5et[pQE30-Edfr]重组克隆。再以其重组质粒转化M15[pREP-4]感受态细胞，筛选出M15[pQE30-Eqfr，pREP-4]重组克隆。通过诱导表达，检测到了相对分子质量约为116000的重组蛋白表达，在诱导后的1～3h里表达量较高，之后表达量开始下降。用实验证实了理论推测ORF的正确性，所获得的表达蛋白及其表达体系为下一步的蛋白质实验奠定了基础。

主 题 词：杂交籼稻 姊妹染色单体粘着蛋白 OsRad21-i 原核表达 载体构建 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:0529-6579.2009.01.013

馆 藏 号：203158269...