鸭黄病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用

作     者：高凤 于可响 马秀丽 李玉峰 王友令 李建亮 崔言顺 

作者机构：山东农业大学动物科技学院山东泰安271018 山东省农业科学院家禽研究所山东济南250023 华南农业大学动物医学院广东广州510642 

出 版 物：《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期：2013年第33卷第1期

页      码：16-19页

摘      要：根据鸭黄病毒E蛋白基因序列设计了1对特异性引物和TaqMan探针,建立了实时荧光定量RT-PCR检测鸭黄病毒的方法。根据含鸭黄病毒目的扩增片段的质粒拷贝数与定量反应Ct值的关系,绘制了标准曲线(Y=-3.39 X+43.18,r=0.973)。该方法具有特异性,对鸭病毒性肝炎病毒、禽流感病毒、新城疫病毒、腺病毒、鸭瘟病毒、猪乙脑病毒的核酸都没有扩增反应。敏感性试验显示,建立的此方法最低可检出1.9个TCID50病毒核酸。该方法对5只健康雏鸭人工感染86h后的组织器官样品(盲肠扁桃体除外)的检测结果均为阳性,与病毒分离鉴定的阳性符合率为100%。结果表明,该方法真实可靠,而且从核酸提取到报告检测结果耗时不超过3h,为鸭黄病毒病提供了一种敏感特异的定量检测方法。

主 题 词：鸭黄病毒 实时荧光定量RT-PCR TaqMan探针 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.16303/j.cnki.1005-4545.2013.01.010

馆 藏 号：203159553...