滇龙胆GrHMA基因的克隆和原核表达

作     者：王彩云 李富生 李涛 李彩霞 张晓东 王元忠 WANG Cai-yun;LI Fu-sheng;LI Tao;LI Cai-xia;ZHANG Xiao-dong;WANG Yuan-zhong

作者机构：云南农业大学农学与生物技术学院中国云南昆明650201 玉溪师范学院资源与环境学院中国云南玉溪653100 云南省农业科学院药用植物研究所中国云南昆明650223 

基　　金：国家自然科学基金项目(81260608) 云南省教育厅科学研究基金重点项目(2013Z075) 科技部"十二五"国家科技支撑计划项目(2011BAI13B02-04) 

出 版 物：《生命科学研究》 (Life Science Research)

年 卷 期：2014年第18卷第3期

页      码：211-217页

摘      要：HMA蛋白(heavy metal transporting ATPase)是一种在植物中广泛存在的多功能蛋白。根据滇龙胆转录组GrHMA基因序列,设计特异性引物,通过RT-PCR扩增GrHMA基因序列,并进行TA克隆、测序及序列分析;构建原核表达载体pGEX-4T-1-GrHMA,转入*** Rosetta(DE3)中,并在37℃、1.0 mmol/L IPTG下成功诱导表达。序列分析表明,GrHMA基因是HMA超家族的成员;GrHMA氨基酸序列系统发育分析表明,GrHMA与TcHMA处于同一进化枝。SDS-PAGE结果表明所表达蛋白与预期蛋白大小一致。这些结果为GrHMA蛋白的进一步纯化及结构和功能的研究奠定基础。

主 题 词：滇龙胆 GrHMA基因 克隆 原核表达 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.16605/j.cnki.1007-7847.2014.03.013

馆 藏 号：203159617...