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哈密瓜SSR体系的建立及反应条件的优化

哈密瓜SSR体系的建立及反应条件的优化

作     者:丁群英 赵银萍 廖新福 郭霭光 DING Qun-ying;ZHAO Yin-ping;LIAO Xin-fu;GUO Ai-guang

作者机构:西安文理学院生物技术学院西安710065 新疆维吾尔自治区葡萄瓜果开发研究中心新疆鄯善838201 西北农林科技大学生命科学学院陕西杨凌712100 

基  金:新疆维吾尔自治区自然科学基金资助项目(200721106) 

出 版 物:《西安文理学院学报(自然科学版)》 (Journal of Xi’an University(Natural Science Edition))

年 卷 期:2013年第16卷第1期

页      码:39-43页

摘      要:以新疆哈密瓜为试验材料,利用正交试验设计研究了4个主要因子(Mg2+、DNA聚合酶、SSR引物和dNTP)对SSR扩增结果的影响,并对该哈密瓜SSR反应体系进行了优化,同时尝试用降落(Touchdown,TD)PCR方法扩增目的片段.最终筛选出如下最佳反应体系:总反应体积为25μL,其中dNTP 200μmol/L,SSR引物0.75μmol/L,Taq DNA聚合酶1.0 U,Mg2+1.5 mmol/L;降落PCR省却了常规PCR中摸索最适退火温度的过程,对一些Tm值相近的PCR反应可应用一套温度程序扩增,是一种行之有效的方法.

主 题 词:甜瓜 SSR PCR扩增 正交设计 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D O I:10.3969/j.issn.1008-5564.2013.01.010

馆 藏 号:203161087...

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