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角质细胞生长因子噬菌体活性肽的构建及其对表皮细胞增殖的作用

角质细胞生长因子噬菌体活性肽的构建及其对表皮细胞增殖的作用

作     者:宗宪磊 姜笃银 李国菊 蔡景龙 ZONG Xian-lei;JIANG Du-yin;LI Guo-ju;CAI Jing-long

作者机构:中国医学科学院整形外科医院整形十六科北京100144 山东大学第二医院整形外科 山东大学口腔医学院放射科 

基  金:国家自然科学基金(30670571、81071560、81201467) 北京市自然科学基金(7122138) 山东省自然科学基金(ZR2011HM027) 

出 版 物:《中华医学杂志》 (National Medical Journal of China)

年 卷 期:2013年第93卷第14期

页      码:1058-1062页

摘      要:目的构建展示角质细胞生长因子(KGF)噬菌体活性肽,检测其促表皮细胞增殖的作用。方法选择4个KGF序列,设计引物;用反转录.PCR法获得3个KGF序列(Pl、P2和P4),直接合成1个KGF序列(P3);将KGF序列亚克隆至噬菌粒pComb3中;用噬菌体展示技术,将KGF基因片段展示于噬菌体表面;用四甲基偶氮唑盐(MTF)法检测KGF噬菌体活性肽促表皮细胞增殖的作用,测定其在570nm的吸光度(A)值,用免疫荧光法检测其细胞亲和力。结果获得4种KGF基因,构建在噬菌粒pComb3中;通过噬菌体展示技术将其表达于噬菌体的表面。MTr检测的吸光度(A)值结果显示阴性对照组(0.293±0.017)与KGF对照组(0.520±0.043)及4种KGF噬菌体活性肽组(P1~4)(0.469±0.057、0.441±0.048、0.438±0.035、0.446±0.037)间差异均有统计学意义(均P〈0.01),免疫荧光检测结果显示KGF和4种KGF噬菌体活性肽与表皮细胞具有较好的亲和力。结论构建展示的KGF噬菌体活性肽能够显著促进表皮细胞增殖。

主 题 词:细菌噬菌体 肽库 角质细胞生长因子 表皮细胞 

学科分类:1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 100101[100101] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2013.14.006

馆 藏 号:203161098...

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