siRNA抑制TPP1对人骨肉瘤端粒酶阴性细胞U2OS放射敏感性的影响

作     者：羌伟光 吴琴琴 杨垒 柳正春 江换钢 周福祥 谢丛华 周云峰 WU Qin-qin;YANG Lei;LIU Zheng-chun;JIANG Huan-gang;ZHOU Fu-xiang;XIE Cong-hua

作者机构：湖北省肿瘤生物学行为重点实验室武汉大学中南医院放化疗科武汉430071 

基　　金：国家自然科学基金(81071825) 

出 版 物：《中华放射医学与防护杂志》 (Chinese Journal of Radiological Medicine and Protection)

年 卷 期：2013年第33卷第6期

页      码：579-583页

摘      要：目的 观察人骨肉瘤细胞U2OS中TPP1表达受抑制后其端粒长度和放射敏感性变化，探讨在端粒酶阴性肿瘤细胞中TPP1与端粒长度及放射敏感性之间的关系。方法 根据TPP1 mRNA编码序列设计并合成干扰siRNA序列，瞬时转染U2OS细胞；使用RT-PCR和Western blot分别在基因和蛋白水平检测干扰前后TPP1表达量的变化；利用Real-time PCR检测细胞端粒长度的变化；运用流式细胞术（Annexin V-FITC法）检测细胞凋亡情况；采用克隆形成实验分析放射敏感性的变化。结果 siRNA转染U2OS细胞后，siRNA干扰组的mRNA基因表达抑制率为（65.70±2.10）%，蛋白表达抑制率为（74.80±3.20）%；siRNA干扰组相对端粒长度（0.99±0.07）明显短于阴性对照组（1.64±0.05）及空白组（1.55±0.05）（F=113.68，P〈0.01），而阴性对照组与空白组间端粒长度差异无统计学意义；siRNA干扰组细胞凋亡率为（13.67±0.85）%，高于阴性对照组（8.59±0.38）%及空白组（8.18±0.21）%（F=92.32，P〈0.01）；siRNA干扰组细胞株SF2 值（0.6074±0.0115）较空白组（0.8062±0.0056）降低显著（F=246.45，P〈0.01），放射增敏比为1.33。结论 在端粒酶阴性细胞U2OS中，特异性地沉默TPP1能够引起端粒长度的缩短，并且增加了细胞的放射敏感性，推测干扰TPP1引起端粒缩短很可能是其放射增敏的机制之一。

主 题 词：RNA干扰 TPP1 端粒 端粒长度 放射敏感性 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3760/cma.j.issn.0254-5098.2013.06.003

馆 藏 号：203161127...