苏云金芽胞杆菌cry1Ie新基因的克隆、表达与生物活性测定

作     者：余宗兰 贺利业 龚莉 黄刚辉 李平 郑爱萍 Yu Zonglan;He Liye;Gong Li;Huang Ganghui;Li Ping;Zheng Aiping

作者机构：四川农业大学水稻研究所温江611130 四川农业大学西南作物基因资源与遗传改良教育部重点实验室雅安625014 

基　　金：国家重大转基因专项(2011ZX08009-003-001-009) 

出 版 物：《植物保护学报》 (Journal of Plant Protection)

年 卷 期：2016年第43卷第2期

页      码：201-206页

摘      要：为获得新的鳞翅目害虫杀虫基因,根据已知cry1I类基因编码区设计简并引物,采用直接克隆法,以苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)菌株BN23-5质粒DNA为模板进行扩增,并对得到的基因进行鉴定和分析。结果表明:克隆得到一个完整的cry1Ie基因,全长2 160 bp,由719个氨基酸组成,该氨基酸序列与已知的4种Cry1Ie蛋白不同,与Cry1Ie2和Cry1Ie3的氨基酸序列同源性最高,为95.4%,被国际Bt杀虫晶体蛋白基因命名委员会命名为Cry1Ie5(登录号为KJ710646)。将该基因插入表达载体p ET-28a,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG低温诱导成功表达,SDS-PAGE电泳验证其大小为81 k D,与预测的分子量相符合。生物活性测定表明,Cry1Ie5表达的包涵体蛋白对小菜蛾和亚洲玉米螟具有杀虫活性,LC_(50)分别为0.43μg/m L和48.39μg/m L;对棉铃虫的致死率不高,但能明显抑制其生长;对甜菜夜蛾没有杀虫活性。

主 题 词：苏云金芽胞杆菌 cry1Ie5基因 鳞翅目害虫 克隆 

学科分类：09[农学] 0904[农学-动物医学类] 

核心收录：

D　O　I：10.13802/j.cnki.zwbhxb.2016.02.004

馆 藏 号：203162771...