流感复合多表位疫苗的设计及小鼠免疫研究

作     者：贾雷立 金宁一 鲁会军 金洪涛 王瑞琳 田明尧 陈义峰 郑敏 李昌 李霄 马明潇 金扩世 JIA Lei-li;JIN Ning-yi;LU Hui-jun;JIN Hong-tao;WANG Rui-lin;TIAN Ming-yao;CHEN Yi-feng;ZHENG Mi;LI Chang;LI Xiao;MA Ming-xiao;JIN Kuo-shi

作者机构：军事医学科学院军事兽医研究所吉林长春130062 

基　　金：长春市科技计划项目(04-02GG217) 

出 版 物：《广西农业生物科学》 (Journal of Guangxi Agricultural and Biological Science)

年 卷 期：2006年第25卷第B09期

页      码：209-210页

摘      要：鉴于目前出现了多种亚型禽流感病毒共存的局面，研究多价流感疫苗具有重要意义。根据各表位的免疫学特性，结合分子生物学信息软件的模拟功能，以H3、H9亚型流感病毒的HA抗原表位、流感病毒的其他主要抗原（NP、NA、M）表位的基因为基础，再附以Kozak序列和适当的酶切位点，设计并合成大小为765bp的复合多表位基因盒-Epi。将Epi基因克隆入真核表达载体pIRES1neo中，构建DNA重组体pIR—Epi；将H7HA、Epi、H5HA基因以融合表达方式克隆到pIRES1neo中，构建了DNA重组体pIRE—H57一Epi。以上述构建的DNA重组体与鸡痘病毒重组株对BALB／c小鼠进行免疫接种后，检测体液与细胞免疫指标。研究结果表明，流感病毒复合多表位DNA重组体pIRE—H57-Epi、pIRE—Epi免疫组小鼠均能产生针对H3亚型流感病毒的特异性抗体，抗体效价（1：1600～1：64003低于灭活疫苗免疫组（1：12800），但均高于其他对照免疫组（P〈0．01）。pIRE—H57-Epi免疫组抗H5、H7HA抗体效价分别为1：12800和1：6400，均高于其他免疫组（P〈0．05）。pIRE—Epi免疫组抗H5、H7HA抗体效价（1：200，1：100）较低，与其他对照免疫组差异不显著。pIRE—H57-Epi与pIRE—Epi免疫组抗H9亚型AIV的HA抗体效价（1：6400，1：3200）明显高于其他免疫组（P〈0．05）。与PBS对照组及空质粒pIRES1neo对照组比较，用所构建的重组体免疫的各试验组小鼠的T淋巴细胞亚类CD4^＋和CD8^＋的数量显著提高（P〈0．05）。pIRE—H57-Epi与pIRE—Epi试验组的CD4^＋与CD8^＋淋巴细胞的数量较灭活苗显著增多（P〈0．05），而各重组体免疫组之间差异不显著。此外，所有组的CD4^＋／CD8^＋比值均稳定在1．5～2．0，表明无异常免疫应答出现。ELISPOT检测小鼠脾淋巴细胞分泌IFN—γ斑点数实验结果表明，pIRE—H57-Epi、pIRE—Epi试验组的IFN—γ斑点数量（〉70）比灭活苗（〈40）显著增多（P〈0．05），而各重组体免疫组之间差异不显著。上述结果说明，所构建的DNA重组体有良好的免疫原性，为最终获得能同时预防多种亚型流感病毒的多价疫苗奠定了基础。

主 题 词：禽流感病毒 表位 疫苗 

学科分类：090602[090602] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

馆 藏 号：203162828...