特异性小干扰RNA沉默Polo样激酶1基因表达对恶性胶质瘤细胞增殖的影响

作     者：范钰 朱夫 史德刚 FAN Yu;ZHU Fu;SHI De-gang

作者机构：江苏大学附属人民医院肿瘤研究所镇江212002 南方医科大学珠江医院肿瘤中心广州510282 

基　　金：基金项目:中国博士后科学基金项目(2003033547) 

出 版 物：《中华神经医学杂志》 (Chinese Journal of Neuromedicine)

年 卷 期：2009年第8卷第1期

页      码：5-9页

摘      要：目的探讨Polo样激酶I（PLK1）基因对胶质瘤细胞增殖的影响和可能机制。方法根据PLKl基因特点，设计并用化学方法合成了5个小干扰核糖核酸分子（siRNA）（P1、P2、P3、P4和P51。以这5个siRNA转染人胶质瘤TJ905细胞后，分别采用荧光实时定量RT—PCR和Westernblot检测儿KJmRNA和蛋白表达水平。分别采用MTT法和Westernblot方法检测癌细胞增殖和增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白水平，用TRAP—ELISA方法检测胶质瘤细胞端粒酶活性。结果所设计的5个siRNA均能明显抑制胶质瘤TJ905细胞PLKImRNA水平，以P4效果最好。以P4转染处理胶质瘤细胞后与脂质体对照组比较，PLKI基因mRNA水平和蛋白水平明显下调．差异有统计学意义（P均=0．000）。MTT结果显示，与脂质体对照组比较P4siRNA转染组癌细胞生长明显受到抑制．且呈浓度依赖性（r=0．868，P=0．000）。Western blot结果显示，与脂质体对照组比较P4siRNA转染组PCNA蛋白水平明显下降，差异有统计学意义（F=181．36，P=0．000）。***结果显示，与脂质体对照组比较P4siRNA转染组胶质瘤细胞端粒酶活性明显受到抑制，且呈浓度和时间依赖性（p=0．000）。结论PLKI基因对胶质瘤细胞增殖具有重要的调控作用：以PLKI siRNA转染处理胶质瘤细胞，可明显抑制胶质瘤细胞的恶性增殖，其机制可能与抑制端粒酶活性有关。

主 题 词：神经胶质瘤 Polo样激酶1 RNA干扰 小干扰RNA 端粒酶 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3760/cma.j.issn.1671-8925.2009.01.002

馆 藏 号：203163511...