大麦醇溶蛋白基因片段克隆和RNAi植物表达载体构建

作     者：闫永荣 张正英 李静雯 李淑洁 YAN Yongrong;ZHANG Zhengying;LI Jingwen;LI Shujie

作者机构：甘肃省农业科学院生物技术研究所兰州730070 甘肃农业大学农学院兰州730070 

基　　金：甘肃省农牧厅生物技术专项(GNSW-2006-05) 

出 版 物：《科技导报》 (Science & Technology Review)

年 卷 期：2010年第28卷第12期

页      码：52-55页

摘      要：为了降低啤酒大麦蛋白的含量,提高啤酒大麦品质,利用甘肃推广面积最大的品种甘啤4号为材料,克隆大麦醇溶蛋白基因保守区序列,构建RNAi表达载体。根据已知大麦醇溶蛋白基因保守序列设计一对特异性引物B2PF5′-CAACCATTTC-CACAGCAACCACCAT-3′,B2PR5′-GAAAGATAGAGTAGACGATTGCACG-3′,采用PCR技术从甘啤4号大麦基因组中获得了1个349bp片段(GP4)。依据载体pHANNIBAL和pART27的结构,分别将GP4按所对应酶切位点正反向插入,利用热激法转化。结果分析显示,克隆出的片段与GenBank(NCBI)中醇溶蛋白基因核苷酸序列同源性高达92%,所构建成的RNAi表达载体pART27-pHAN-GP4中含目标片段。

主 题 词：大麦 醇溶蛋白 RNAi表达载体 

学科分类：09[农学] 0901[农学-植物生产类] 

馆 藏 号：203164209...