土壤镰孢菌Real-Time QPCR定量方法的建立及应用

作     者：魏巍 许艳丽 刘金波 李春杰 韩晓增 李文滨 李淑娴 WEI Wei;XU Yan-li;LIU Jin-bo;LI Chun-jie;HAN Xiao-zeng;LI Wen-bin;LI Shu-xian

作者机构：中国科学院东北地理与农业生态研究所黑龙江哈尔滨150081 大豆生物学教育部重点实验室黑龙江哈尔滨150030 中国科学院研究生院北京100049 Crop Genetics Research Unit(CGRU)United States Department of Agriculture-Agricultural Research Service(USDA-ARS)Stoneville 38776USA 

基　　金：中国科学院知识创新工程重大资助项目(KSCX1-YW-09-09) 大豆生物学省部共建教育部重点实验室开放基金资助项目(SB08B01) 国家“十一五”科技支撑计划资助项目(2006BAD21B01-15) 

出 版 物：《大豆科学》 (Soybean Science)

年 卷 期：2010年第29卷第4期

页      码：655-658,662页

摘      要：基于镰孢菌ITS序列,设计一对应用于实时荧光定量PCR(Real-Time QPCR)反应的镰孢菌属特异性引物TS和TR,并建立了相应的Real-Time QPCR体系。应用该反应体系,绝对定量了无肥(NF)、化肥(NP)以及化肥配施有机肥(NPM)等3种施肥措施下大豆田土壤镰孢菌DNA含量。结果表明:引物TS和TR对镰孢菌属真菌有较好的特异性;Real-Time QPCR反应的扩增曲线中各梯度浓度标准品的循环阈值(Ct值)间隔均匀,熔点曲线无杂峰,标准曲线的相关系数R2=0.993,斜率为-0.2927;在大豆生育时期的苗期,NF、NP及NPM措施下土壤镰孢菌总DNA每克干土中含量分别为18.33、44.61和140.83 pg,且NPM措施含量极显著高于NF及NP措施(P<0.01)。

主 题 词：镰孢菌 实时荧光定量PCR 绝对定量 

学科分类：09[农学] 0904[农学-动物医学类] 090401[090401] 

核心收录：

馆 藏 号：203164280...