禽网状内皮组织增生病病毒TaqMan探针荧光定量PCR检测方法的建立及应用

作     者：李凯 高宏雷 高立 祁小乐 高玉龙 徐延伟 王笑梅 

作者机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所禽传染病研究室兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 

基　　金：现代农业肉鸡产业技术体系建设项目(nycytx-42-G3-01) 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2010年第40卷第11期

页      码：1137-1141页

摘      要：根据GenBank中禽网状内皮组织增生病病毒(REV)基因组序列设计1对针对REVgp90基因的引物和1条特异性TaqMan探针,建立了一种快速检测REV病毒载量的TaqMan荧光定量PCR方法。通过对反应条件和反应体系的优化,使得该方法在1×101～1×108copies/μL范围内具有良好的线性关系,灵敏度达到10copies/μL,是常规PCR方法的100倍,该方法与其他禽病病毒无交叉反应,批间与批内重复性试验变异系数均小于2%。用REV HLJR0901株人工感染1日龄SPF雏鸡,定期剖检,对感染鸡体内各器官的病毒分布及载量进行检测,结果表明,在肝、脾、法氏囊、胸腺和腺胃中均可检测到病毒,其病毒载量并无明显差异。本研究结果表明,该方法具有良好的敏感性、特异性和重复性,可用于REV的定量检测,为该病毒的诊断及致病性的研究提供了技术手段。

主 题 词：禽网状内皮组织增生病病毒 荧光定量聚合酶链反应 TaqMan探针 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.16656/j.issn.1673-4696.2010.11.014

馆 藏 号：203164392...