SYBR Green荧光PCR检测美洲钩虫方法的建立

作     者：汪家旭 黄建炜 叶曦 李国伟 牛建军 WANG Jia-xu;HUANG Jian-wei;YE Xi;LI Guo-wei;NIU Jian-jun

作者机构：厦门市疾病预防控制中心厦门361021 厦门市海沧区疾病预防控制中心厦门361026 

基　　金：福建省医学创新基金(2009-CXB-67) 厦门市科技基金(3502Z20094021) 福建省科技项目(2008N2005)联合资助 

出 版 物：《中国人兽共患病学报》 (Chinese Journal of Zoonoses)

年 卷 期：2010年第26卷第12期

页      码：1110-1113页

摘      要：目的建立荧光定量PCR检测美洲钩虫的方法。方法提取虫体基因组DNA、根据GenBank中美洲钩虫ITS-2序列设计特异引物,PCR扩增ITS-2序列、克隆、测序和比对。常规PCR检验引物特异性。将ITS-2序列扩增产物回收、纯化后经T克隆转入大肠埃希菌DH5α,提取重组质粒,鉴定后作为标准品模板建立荧光定量PCR标准曲线,并做灵敏性和重复性试验。结果构建的荧光定量PCR标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,溶解曲线的吸收峰单一,实验重复性良好。结论成功构建了SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测美洲钩虫的方法,可用于快速、准确、定量检测美洲钩虫。

主 题 词：美洲钩虫 rDNAITS-2序列 荧光定量PCR SYBR Green Ⅰ 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1002-2694.2010.12.007

馆 藏 号：203164434...