荧光实时定量PCR定量水体中日本血吸虫尾蚴方法的建立

作     者：王本敬 王文波 周霞 陈艳勤 张静 刘晨晨 梁幼生 诸葛洪祥 WANG Ben-jing;WANG Wen-bo;ZHOU Xia;CHEN Yan-qin;ZHANG Jing;LIU Chen-chen;LIANG You-sheng;ZHUGE Hong-xiang

作者机构：苏州大学医学部基础医学与生物科学学院病原生物学系苏州215123 卫生部寄生虫病预防与控制技术重点实验室江苏省血吸虫病防治研究所无锡214064 

基　　金：江苏省自然科学基金(BK2009076)资助 

出 版 物：《中国人兽共患病学报》 (Chinese Journal of Zoonoses)

年 卷 期：2011年第27卷第12期

页      码：1075-1081页

摘      要：目的建立快速、高效、特异的定量水体中尾蚴的数量和检测水体中日本血吸虫尾蚴残余基因组DNA的方法,来评估水体受日本血吸虫尾蚴污染的程度。方法根据日本血吸虫基因组DNA中的3个多拷贝序列Sjrh1.0(序列号:U92488.1)、18S小亚基单位核糖体核酸基因(18SrRNA)序列(序列号:AY157226.1)和逆转录转座子SjR2的G55A序列(G55A)(序列号:AF412221.1),设计常规PCR引物和实时定量PCR引物,选取较好的靶序列建立SYBR GreenI实时定量PCR方法,绘制尾蚴数的对数与Ct值的标准曲线,并对疫水中日本血吸虫尾蚴残余的基因组DNA进行检测。结果尾蚴数的对数与Ct值的标准曲线有良好的线性关系,相关系数r2为0.918 6,重复性良好。结论本方法特异性高,灵敏,可定量水体中尾蚴数,对疫水检测有一定的预警作用。

主 题 词：日本血吸虫 尾蚴 荧光实时定量PCR 预警 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1002-2694.2011.12.003

馆 藏 号：203164989...