RegⅠ在胃泌素促胃癌细胞体外增殖通路中的作用

作     者：程珊 丁一 张钦宪 CHENG Shan;DING Yi;ZHANG Qin-xian

作者机构：郑州大学基础医学院组织学胚胎学教研室河南省分子医学重点学科开放实验室郑州450052 新乡医学院基础医学院组织学胚胎学教研室河南新乡453003 

出 版 物：《解剖学报》 (Acta Anatomica Sinica)

年 卷 期：2012年第43卷第1期

页      码：63-67页

摘      要：目的探讨再生蛋白I(RegⅠ)在胃泌素刺激胃癌细胞增殖通路中的作用。方法根据RegⅠcDNA已知序列,在线设计3个小干扰RNA,并经基因库同源性比较,构建其RegⅠ-shRNA表达载体(pSUPER-EGFP-REG/1、pSUPER-EGFP-REG/2和pSUPER-EGFP-REG/3),利用脂质体2000转染试剂分别转染胃癌细胞BGC823细胞株、SGC7901细胞株,同时设转染空质粒的实验对照组和无质粒转染的空白细胞组。后经G418筛选建立稳定转染细胞株。RT-PCR检测RegⅠ基因mRNA的转录水平,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测胃泌素孵育对胃癌细胞增殖的效应。结果酶切及测序鉴定,插入片段正确,3个RegⅠ-shRNA表达载体构建成功;RT-PCR显示,pSUPER-EGFP-REG/1可有效抑制RegⅠmRNA在胃癌细胞BGC823、SGC7901的转录。Western boltting结果显示,BGC823和SGC7901细胞的RegⅠ蛋白表达率分别下调到空载体对照组的(45±4)%和(53±4)%;MTT结果显示,RegⅠ基因表达抑制胃癌细胞系的增殖效率均降低(P0.05)。结论实验成功建立了RegⅠ基因表达抑制的胃癌细胞系;RegⅠ基因可能对胃泌素促胃癌细胞的增殖有促进的作用。

主 题 词：Reg Ⅰ基因 胃泌素 胃癌细胞 RNA干扰 反转录聚合酶链式反应 免疫印迹法 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.0529-1356.2012.01.012

馆 藏 号：203165027...