沼泽型水牛NANOG基因5′调控序列克隆与功能分析

作     者：崔奎青 张会娜 刘帅 刘晓华 杨素芳 刘庆友 石德顺 CUI Kui-qing;ZHANG Hui-na;LIU Shuai;LIU Xiao-hua;YANG Su-fang;LIU Qing-you;SHI De-shun

作者机构：广西大学亚热带生物资源保护利用国家重点实验室南宁530004 

基　　金：国家高技术研究发展计划(863)项目(2011AA100607) 国家转基因重大专项(2011ZX08007-003) 国家自然科学基金(30960251) 

出 版 物：《畜牧兽医学报》 (ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA)

年 卷 期：2013年第44卷第3期

页      码：387-394页

摘      要：为探讨沼泽型水牛NANOG基因的表达调控模式,本研究扩增克隆了广西本地沼泽型水牛NANOG基因的5′调控序列片段,设计了-1 213、-745、-425和-312bp 4个缺失体片段,分别构建成EGFP报告载体。应用显微注射报告载体生产转基因水牛和猪胚胎,并转染水牛胎儿成纤维细胞。结果发现,EGFP的表达仅限于水牛囊胚内细胞团。各缺失体在猪4.5d胚胎中均能启动下游EGFP的表达,转录活性两两之间差异均极显著,按活性从大到小依次为-745、-425、-1 213和-312bp。各缺失体报告载体转染水牛成纤维细胞48h后均可见少数细胞发光,其中-425bp活性极显著高于其他缺失体,-1 213与-745bp之间无显著差异,二者均极显著高于-312bp。以上结果说明,水牛NANOG基因翻译起始位点上游-1 213bp在水牛囊胚中可以调控NANOG在内细胞团中的特异性表达;-1 213～-745bp含有多能细胞特异性的抑制子元件;-745～-425bp含有多能性细胞特异性的增强子元件;-425～-312bp含有非多能细胞特异性的增强子元件。

主 题 词：沼泽型水牛 NANOG 调控序列 克隆 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 0905[农学-林学类] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0836[0836] 090501[090501] 

核心收录：

馆 藏 号：203165506...