SARS冠状病毒环介导等温扩增可视化检测方法的建立

作     者：吕恒 张锦海 陈凤娟 顾海涛 王平 王玉邦 王长军 

作者机构：南京医科大学公共卫生学院江苏南京210029 南京军区疾病预防控制中心 

基　　金：江苏省科技支撑计划(社会发展)项目(BE2012609) 国家重大传染病专项课题(2013ZX10004-103 2013ZX10004-218) 南京军区重点课题(10Z038 11Z040) 全军后勤科研"十二五"重大项目(AWS11C001 AWS11C009) 

出 版 物：《实用预防医学》 (Practical Preventive Medicine)

年 卷 期：2013年第20卷第4期

页      码：395-399页

摘      要：目的应用环介导等温扩增(LAMP)技术建立SARS冠状病毒可视化快速检测方法。方法针对SARS冠状病毒RNA聚合酶编码基因保守区设计LAMP引物及环引物,反应体系加入钙黄绿素作为LAMP扩增反应指示剂,结合LAMP浊度仪优化扩增条件,根据钙黄绿素的颜色变化进行结果判定,评价所建立LAMP方法的特异性和灵敏性。结果本方法最低检出限约为10拷贝/反应管,高于普通PCR;检测特异性高,仅SARS冠状病毒反应管钙黄绿素颜色由褐色变为黄绿色,而甲型H1N1病毒、高致病性H5亚型禽流感病毒、普通流感病毒均不发生变色反应;体系的扩增效率高于普通PCR,35 min内出结果。结论所建立的基于颜色判定的SARS病毒检测方法具有特异、灵敏、设备要求简单等特点,适用于SARS冠状病毒现场快速检测。

主 题 词：SARS病毒 可视化检测 环介导等温扩增(LAMP) 钙黄绿素 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1006-3110.2013.04.004

馆 藏 号：203165551...