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band3基因在斑马鱼早期胚胎中的表达

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作     者:庹媛媛 尚鲁俊 夏海雄 何志旭 舒莉萍 TUO Yuanyuan;SHANG Lujun;XIA Haixiong;HE Zhixu;SHU Liping

作者机构:贵州医科大学儿科教研室贵州贵阳550004 贵州医科大学免疫学教研室贵州贵阳550004 贵州医科大学实验动物中心贵州贵阳550004 贵州医科大学儿科教研室,贵州贵阳 550004 贵州医科大学组织工程与干细胞实验中心,贵州贵阳 550004 贵州医科大学免疫学教研室,贵州贵阳 550004 贵州医科大学实验动物中心,贵州贵阳 550004 贵州医科大学组织工程与干细胞实验中心,贵州贵阳 550004 

基  金:国家自然科学基金(31260284 31360285) 贵州省科技基础条件平台项目[(2009)4005] 贵州省优秀科技省长专项基金(S2008-4) 

出 版 物:《贵州医科大学学报》 (Journal of Guiyang Medical College)

年 卷 期:2016年第41卷第7期

页      码:760-764页

摘      要:目的:用band3基因的反义 mRNA探针进行斑马鱼全胚胎原位杂交,检测 band3基因在野生型Tüebingen斑马鱼胚胎发育过程中的表达。方法:Trizol法提取斑马鱼胚胎总RNA并设计特异性引物,采用RT-PCR法扩增band3基因cDNA编码区片段;通过基因重组技术构建PBSK-band3重组质粒,用BamHⅠ酶切得到线性化PBSK-band3;以T7 RNA聚合酶转录合成反义地高辛标记的band3 RNA探针,用全胚胎原位杂交法检测band3基因在斑马鱼胚胎早期的表达情况。结果:成功克隆band3基因片段,构建PBSK-band3重组质粒;经体外转录获得地高辛标记的反义band3 mRNA探针,原位杂交后检测证实band3基因在斑马鱼胚胎早期发育过程中间细胞群(ICM)和主动脉性腺中肾区(AGM)呈现高表达。结论:地高辛标记的反义band3 mRNA探针可检测到斑马鱼胚胎中band3基因的定位表达。

主 题 词:斑马鱼 胚胎 band3 全胚胎原位杂交 探针 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 071008[071008] 

D O I:10.19367/j.cnki.1000-2707.2016.07.004

馆 藏 号:203165670...

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