犬疥蟎副肌球蛋白抗血清的制备及临床应用

作     者：李红飞 赵传壁 姚国佳 王海华 夏艳勋 皇甫和平 张磊 沈永恕 张华 米俊宪 叶晓敏 

作者机构：河南牧业经济学院动物医学系河南郑州450011 中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 

基　　金：国家自然科学基金项目(30600450) 

出 版 物：《郑州牧业工程高等专科学校学报》 (Journal of Zhengzhou College of Animal Husbandry Engineering)

年 卷 期：2014年第34卷第1期

页      码：5-11页

摘      要：目的:利用现代分子生物学方法,建立一种准确率更高的犬疥蟎病的诊断方法,为犬疥蟎病的治疗提供诊断基础。方法:收集犬疥蟎,抽提总RNA并将其反转录为cDNA;以该cDNA为模板,参考其它哺乳动物副肌球蛋白的基因序列特征,设计引物扩增含有多个抗原表位的犬副肌球蛋白的部分cDNA序列;构建原核表达载体,表达及纯化目的蛋白片段;以纯化的目的蛋白片段为抗原,免疫BALB/c小鼠制备抗血清;以制备的抗血清为一抗,通过间接ELISA法测定患病犬痂皮组织中疥蟎副肌球蛋白片段的存在,进而判断是否有疥蟎感染。结果:成功构建了副肌球蛋白的原核表达载体,命名为pET28a-Para-202;通过诱导、纯化获得了重组蛋白;该重组蛋白抗原免疫小鼠后获得高效价的抗血清;以该抗血清为工具,通过间接ELISA法极大提高了犬疥蟎感染的诊断率,为该病治疗提供了重要的参考依据。

主 题 词：疥(璊) 副肌球蛋白 抗血清 临床应用 

学科分类：090603[090603] 090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1008-3111.2014.01.002

馆 藏 号：203166042...