查菲埃立克体120kDa抗原蛋白基因的克隆与表达

作     者：陈亮 严延生 翁育伟 王惠榕 于恩庶 

作者机构：福建省卫生防疫站福州350001 

出 版 物：《中国人兽共患病杂志》 (Chinese Journal of Zoonoses)

年 卷 期：2001年第17卷第4期

页      码：13-16页

摘      要：目的　克隆查菲埃立克体 12 0kDa膜表面免疫决定性蛋白基因 ,并使之在原核表达系统中表达。方法　查菲埃立克体分离株 (91HE17)感染DH82细胞 40天后收集DH82细胞。根据查菲埃立克体P12 0蛋白基因序列设计特异性引物 ,套式PCR扩增查菲埃立克体P12 0蛋白基因部分片段 ,将PCR扩增产物用BamHⅠ和EcoRⅠ限制性内切酶双酶切后与 pUC18载体连接 ,在获得阳性克隆子后用限制性内切酶将克隆片段切下 ,定向插入原核表达载体pProEXHTb构建 pProEXHTb/P12 0重组质粒。将重组质粒转化E .coliDH5α ,并使之在IPTG的诱导下进行蛋白质表达。结果　裁短成 10 80bp的查菲埃立克体P12 0蛋白基因克隆到 pUC18载体 ,用IPTG诱导 pProEXHTb/P12 0重组质粒转化的E .coliDH5α ,表达一分子量大小约为 47kDa的融合蛋白。结论　查菲埃立克体 12 0kDa抗原蛋白基因能在原核表达系统中表达 ,为诊断试剂盒的研制及其它研究工作提供了基础。

主 题 词：查菲埃立克体 膜蛋白抗原 基因克隆 表达 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1002-2694.2001.04.004

馆 藏 号：203166133...