HP-PRRSV HuN4株ORF7原核表达载体的构建及表达

作     者：刘洪斌 孙心 李静 李琳 Liu Hongbin;Sun Xin;LiJing;LiLin

作者机构：哈药集团生物疫苗有限公司黑龙江哈尔滨150069 

出 版 物：《中国动物保健》 (China Animal Health)

年 卷 期：2015年第17卷第6期

页      码：66-68,70页

摘      要：目的:构建HP-PRRSV Hu N4株ORF7原核表达载体,诱导表达重组N蛋白。方法:本实验选取HP-PRRSV经典株Hu N4株,根据ORF7序列(EF635006)及原核表达载体PGEX-6p-1中的多克隆位点设计引物,进行ORF7基因的克隆和原核表达载体的构建;将重组载体在原核表达体系中进行表达,通过SDS-PAGE电泳鉴定蛋白表达情况。结果:以HP-PRRSV Hu N4株c DNA为模板,PCR扩增出约为372 bp片段,经插入原核表达载体PGEX-6p-1,构建原核表达质粒PGEX-ORF7,鉴定后经1mmol/L IPTG在37℃下诱导,3 h后蛋白表达量最大;通过SDS-PAGE鉴定蛋白表达成功。结论:成功构建了HP-PRRS Hu N4株ORF7基因原核表达载体,以及进一步表达重组融合N蛋白;为进一步研究病毒的结构及功能奠定基础。

主 题 词：HP-PRRSV 原核表达 N蛋白 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1008-4754.2015.06.039

馆 藏 号：203166608...