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贝氏贝诺孢子虫巢式PCR检测方法的建立

贝氏贝诺孢子虫巢式PCR检测方法的建立

作     者:王文涛 仇建华 段红 常巧呈 路义鑫 王春仁 彭博 Wang Wentao;Qiu Jianhua;Duan Hong;Chang Qiaocheng;Lu Yixin;Wang Chunren;Peng Bo

作者机构:黑龙江八一农垦大学动物科技学院大庆163319 东北农业大学动物医学学院 

基  金:黑龙江省科技攻关项目(GZ13B001) 黑龙江省农垦总局科技攻关项目(HNK125B-11-4) 大庆市科技局计划项目(SZDFY-2015-21) 黑龙江省动物普通疾病防治重点实验室开放课题(120101) 

出 版 物:《黑龙江八一农垦大学学报》 (journal of heilongjiang bayi agricultural university)

年 卷 期:2016年第28卷第2期

页      码:45-49页

摘      要:根据Gen Bank上发表的贝氏贝诺孢子虫核糖体内转录间隔区(ITS)序列,在传统PCR方法的基础上设计一对特异性内引物,提取病牛血液中贝氏贝诺孢子虫基因组DNA,建立了贝氏贝诺孢子虫巢氏PCR检测方法并进行临床样品检测。结果表明,建立的巢式PCR检测方法能检测到贝氏贝诺孢子虫DNA的最低浓度为24.3 ag·μL-1,刚地弓形虫、犬新孢子虫、牛巴贝斯虫、环形泰勒虫、边缘无浆体DNA检测均为阴性。196份临床血液样本,检测出3份阳性,阳性率为1.53%。由此可见,研究所建立的巢氏PCR检测方法具有较高的特异性和敏感性,可用于牛贝诺孢子虫病的早期临床诊断。

主 题 词:贝氏贝诺孢子虫 巢氏PCR 检测 核糖体内转录间隔区 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D O I:10.3969/j.issn.1002-2090.2016.02.009

馆 藏 号:203166927...

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