人CARABIN蛋白过表达慢病毒载体构建及其稳定表达细胞株的筛选

作     者：刘凯玉 蒋维 王瑞娜 吴家雪 党永军 LIU Kai-yu;JIANG Wei;WANG Rui-na;WU Jia-xue;DANG Yong-jun

作者机构：复旦大学生命科学学院上海200000 复旦大学基础医学院上海200032 

基　　金：国家自然科学基金(21572038) 

出 版 物：《生物学杂志》 (Journal of Biology)

年 卷 期：2016年第33卷第3期

页      码：1-4页

摘      要：构建并鉴定人CARABIN蛋白过表达慢病毒载体,筛选CARABIN过表达的弥散性大B淋巴瘤细胞SUDHL-6的稳定细胞株。通过设计Carabin上下游引物,用同源重组的方法构建慢病毒载体pLENTI-c GFP-CARABIN,将其与psPAX2和pMD2.G包装质粒按3∶2∶1的比例用PEI Transfection Reagent共转染HEK293T细胞制备病毒,用病毒颗粒感染SU-DHL-6细胞2周后,用流式细胞仪分选GFP表达阳性的细胞,Western Blot检测CARABIN-GFP融合蛋白表达。成功构建pLENTI-c GFP-CARABIN慢病毒过表达载体。包装病毒颗粒并感染SU-DHL-6细胞后,荧光显微镜检测和流式细胞分选鉴定表达效率为26.5%,筛选出的GFP阳性细胞用Western Blot检测到CARABINGFP融合蛋白表达。成功构建了Carabin过表达慢病毒载体并筛选出了CARABIN-GFP稳定表达的细胞株。

主 题 词：CARABIN 过表达 稳定细胞株 弥散性大B淋巴瘤 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.2095-1736.2016.03.001

馆 藏 号：203170735...