水牛ALK5基因克隆分析与组织表达模式研究

作     者：朱鹏 赵鲜红 粟小平 苏节 刘金凤 刘庆友 石德顺 ZHU Peng;ZHAO Xian-hong;SU Xiao-ping;SU Jie;LIU Jin-feng;LIU Qing-you;SHI De-shun

作者机构：广西大学亚热带生物资源保护利用国家重点实验室南宁530004 中国农业科学院广西水牛研究所南宁530001 广西医科大学医学科学实验中心南宁530021 广西兽医研究所南宁530001 

基　　金："863"国家高技术研究计划项目(2011AA100607) 国家自然科学基金项目(31160457) 

出 版 物：《黑龙江畜牧兽医》 (Heilongjiang Animal Science And veterinary Medicine)

年 卷 期：2015年第4期

页      码：9-13,246页

摘      要：为了阐明水牛ALK5基因在水牛卵泡发生过程中的作用,了解其在水牛不同组织中的表达模式,试验采用了RT-PCR及QRT-PCR方法对ALK5基因进行了研究,参考已公布的Gen Bank中牛ALK5基因序列,设计特异性引物应用RT-PCR方法扩增克隆获得目的基因片段;应用生物信息学方法,系统分析和预测了水牛ALK5基因的遗传进化、蛋白质的理化性质、二级和三级结构,并应用QRT-PCR技术对ALK5基因在水牛组织的表达进行了差异分析。结果表明:水牛ALK5基因的编码区全长为1 512 bp,共编码503个氨基酸;水牛ALK5核苷酸序列与牛、绵羊、猪、人和小鼠相应序列的相似性分别为99%、97%、95%、93%和90%,结合系统进化树分析结果推测ALK5基因在不同物种以及进化的过程中具有高度保守性;该蛋白呈弱碱性,有信号肽,细胞亚定位于胞膜上,存在low complexity和GS结构,呈典型跨膜蛋白结构;水牛ALK5基因在肺脏、垂体、下丘脑组织中不表达,在水牛大脑、肝脏、骨骼、卵巢、肌肉和心脏等12个组织细胞中具有不同程度的表达,其中卵巢中表达量最高,心脏和肾脏次之,肌肉表达量最低。说明试验成功地克隆了沼泽型水牛ALK5基因,其具备典型的TGF-β受体家族结构,表达具有一定的组织特异性。

主 题 词：水牛 ALK5基因 克隆分析 表达规律 卵泡发生 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 0905[农学-林学类] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2015.0486

馆 藏 号：203171506...