交叉引物恒温扩增技术快速检测副溶血性弧菌耐热直接溶血素基因

作     者：黄世旺 卢亦愚 李剑 徐昌平 方叶珍 蒋雪凤 HUANG Shi-wang;LU Yi-yu;LI Jian;XU Chang-ping;FANG Ye-zhen;JIANG Xue-feng

作者机构：杭州市江干区疾病预防控制中心浙江杭州310004 浙江省疾病预防控制中心浙江杭州310051 

基　　金：杭州市社会发展科研攻关项目(20130533B46) 浙江省医药卫生科技计划(2014ZHA003) 

出 版 物：《中国卫生检验杂志》 (Chinese Journal of Health Laboratory Technology)

年 卷 期：2016年第26卷第13期

页      码：1906-1908,1953页

摘      要：目的建立一种特异、灵敏、简便的交叉引物恒温扩增(cross priming amplification,CPA)技术,快速检测副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)耐热直接溶血素基因(tdh)。方法根据Gen Bank上公布的VP tdh基因序列,在其保守区域设计CPA引物和探针,并对反应体系和反应条件进行优化,同时验证方法的灵敏度和特异性。结果本方法对tdh基因检测具有高度特异性;对tdh阳性质粒DNA和菌液检测的灵敏度分别达到了1.8×101copy/μl和6.2×103cfu/ml;对82份临床标本的检测阳性率与荧光PCR法相同,大大高于传统培养法。结论本研究建立的CPA法快速、简便、灵敏、特异,适用于VP腹泻患者的床边诊断以及食物中毒的现场快速检验中。

主 题 词：副溶血性弧菌 交叉引物恒温扩增 tdh基因 

学科分类：1010[医学-医学技术类] 10[医学] 

馆 藏 号：203171619...