鼻咽癌侯选抑瘤基因BRD7原核表达载体的构建及其表达( 英文)

作     者：聂新民 张必成 向娟娟 朱诗国 周鸣 董利 余鹰 李小玲 李桂源 NIE Xin Min, ZHANG Bi Cheng, XIANG Juan Juan, ZHU Shi Guo, ZHOU Ming, DONG Li, YU Ying, LI Xiao Ling, LI Gui Yuan ** (Cancer Research Institute,Xiang Ya School of Medicine,Central South University, Changsha 410078, China)

作者机构：中南大学湘雅医学院肿瘤研究所长沙410078 

基　　金：国家高技术"863"计划资助项目 (10 2 10 0 1 0 5 ) 国家重点基础研究发展规划项目 (973 ) (G19980 5 10 0 8) 国家自然科学基金资助项目 (3 970 0 15 8 3 0 0 0 0 0 65 )~~ 

出 版 物：《生物化学与生物物理进展》 (Progress In Biochemistry and Biophysics)

年 卷 期：2002年第29卷第4期

页      码：631-634页

摘      要：BRD7基因是一个鼻咽癌侯选抑瘤基因 ,为了构建BRD7基因的原核表达载体并使其在大肠杆菌得到表达 ,设计了带有SalⅠ ,NotⅠ酶切位点的引物 ,以已构建好的质粒 pGEM TEasy/BRD7为模板 ,用PCR扩增出BRD7基因的完整阅读框架 ,并用SalⅠ ,NotⅠ酶切PCR产物和原核表达载体PGEX 4T 2 ,然后用T4DNA连接酶将其连接 ,得到重组表达质粒PGEX 4T 2 /BRD7,经双酶切鉴定和测序验证 ,表达载体构建正确 .重组表达质粒转化感受态大肠杆菌Jm10 5后用IPTG诱导 ,成功表达了一分子质量约为 90ku的融合蛋白 ;37℃诱导 4h后 ,SDS 聚丙烯酰胺凝胶 (PAGE)电泳后 ,经扫描分析该融合蛋白产量占菌体蛋白总量 2 8 4 8% ,蛋白质印迹 (Western blot)证实了该融合蛋白的表达获得成功 .这为BRD7基因的蛋白纯化及抗体制备 ,进一步开展其功能研究奠定了基础 .

主 题 词：鼻咽癌 侯选抑瘤基因 BRD7 构建 表达 原核表达载体 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 0831[工学-公安技术类] 1002[医学-临床医学类] 08[工学] 0703[理学-化学类] 100214[100214] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.0000/j.1000-3282.20022904631634

馆 藏 号：203172529...