利用套式PCR检测牛羊乏质体

作     者：李树清 王贵强 陈志飞 赵俊龙 王巧全 张子群 由轩 胡永强 杜凯 姚宝安 LI Shu-qing;WANG Gui-qiang;CHEN Zhi-fei;ZHAO Jun-long;WANG Qiao-quan;ZHANG Zi-qun;YOU Xuan;HU Yong-qiang;DU Kai;YAO Bao-an

作者机构：上海出入境检验检疫局上海200135 湖北种畜育种中心武汉430070 华中农业大学动物医学院武汉430070 黑龙江出入境检验检疫局哈尔滨150036 

基　　金：国家质检总局科技专项(2005IK179) 

出 版 物：《畜牧兽医学报》 (ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA)

年 卷 期：2011年第42卷第12期

页      码：1768-1775页

摘      要：为同时检测和鉴定牛边缘乏质体、中央乏质体及绵羊乏质体,根据这3种病原体的msp4基因核苷酸序列,自行设计、合成了针对3种乏质体的2对通用引物,及分别针对三者的特异引物,通过PCR条件优化,建立了检测乏质体及分别鉴定3种乏质体的套式PCR方法,并与OIE推荐的msp5半套式PCR比较。结果显示:该方法对牛巴贝斯虫、双芽巴贝斯虫、羊莫氏巴贝斯虫、山羊泰勒虫、温氏附红细胞体、东方巴贝斯虫、刚地弓形虫、伊氏锥虫均未扩增出特异性片段。套式PCR检测乏质体DNA量为0.2pg(相当于6个感染红细胞)。检测1 119份来自6个不同地区的奶牛、肉牛、水牛及羊的临床样品,阳性106份,经鉴定边缘乏质体46份,中央乏质体15份,绵羊乏质体35份,混合感染中央乏质体和绵羊乏质体4份,混合感染边缘乏质体和绵羊乏质体3份,混合感染边缘乏质体和中央乏质体3份。首次在分子生物学水平证明中央乏质体存在于中国。同时,证明牛可以混合感染边缘乏质体和中央乏质体或绵羊乏质体,以及混合感染中央乏质体和绵羊乏质体。上述848份样品用OIE推荐的msp5半套式PCR同时检测,两者符合率为98.5%(835/848)。检测结果表明,msp4套式PCR特异、敏感,可用于边缘乏质体、中央乏质体、绵羊乏质体的检测和鉴定。

主 题 词：msp4 套式PCR 边缘乏质体 中央乏质体 绵羊乏质体 检测 鉴定 

学科分类：090603[090603] 090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

馆 藏 号：203173077...