大鼠FasL基因克隆及重组慢病毒载体pLO134-FasL的构建

作     者：李望 孙晓青 张成静 胡书群 裴东生 

作者机构：徐州医学院附属医院泌尿外科江苏徐州221002 徐州医学院生物化学和分子生物学研究中心江苏徐州221002 

基　　金：江苏省卫生厅"135工程"医学重点人才资助项目(2001-2006) 

出 版 物：《徐州医学院学报》 (Acta Academiae Medicinae Xuzhou)

年 卷 期：2005年第25卷第6期

页      码：514-518页

摘      要：目的克隆大鼠FasL基因全长序列,构建其用于真核细胞表达的重组慢病毒载体pLO134-FasL,为进一步研究FasL蛋白生物学功能奠定基础。方法根据大鼠FasL cDNA序列设计合成上、下游引物,以大鼠脾细胞提取的总RNA为模板,行RT-PCR扩增。扩增片断经限制性内切酶BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切后,插入慢病毒载体pLO134中并转化感受态细胞JM101。扩增后酶切鉴定,对正确的阳性克隆行DNA全序列分析。结果RT-PCR扩增获得870 bp DNA片段,DNA序列分析结果与发表于GenBank上的序列(U03470)完全一致。结论成功克隆大鼠FasL基因并构建其用于真核细胞表达的重组慢病毒载体pLO134-FasL。

主 题 词：FasL 基因克隆 序列分析 慢病毒载体 

学科分类：1003[医学-口腔医学类] 100302[100302] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-2065.2005.06.014

馆 藏 号：203173217...