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快速检测猪链球菌的环介导等温扩增方法(英文)

快速检测猪链球菌的环介导等温扩增方法(英文)

作     者:邱宏 刘志杰 郑瀚 QIU Hong;LIU Zhi-jie;ZHENG Han

作者机构:湖南医药学院怀化418000 湘雅附属第二医院中南大学长沙410000 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所北京102206 

基  金:Supported by grant from the Minister of Science and Technology People’s Republic of China(Nos.2013ZX10004221 2013ZX10004216-001-002and 81261120559)~~ 

出 版 物:《中国人兽共患病学报》 (Chinese Journal of Zoonoses)

年 卷 期:2016年第32卷第6期

页      码:539-545页

摘      要:目的建立猪链球菌(***)的环介导等温扩增方法(LAMP)。方法通过BLASTn序列比对确定较为保守的***种特异基因,用软件PrimerExplorer V4设计针对靶基因的LAMP试验引物;分别用煮沸法和试剂盒提取法提取基因组做敏感性试验,并用62株非***菌株评价了实验的特异性;再用100株分离自不同地区不同时间的***菌株评价该方法的可靠性。结果确定了***种特异性基因dnaN为靶基因,并针对该基因建立了检测***的LAMP方法。敏感性实验中,每个反应的检测下限是31.25fg纯DNA,相当于14个拷贝;煮沸法的检测下限是每个反应27CFU。在对62株非***菌株与有争议的***菌株的特异性评价实验中,未发现有假阳性。结论成功建立了针对dnaN基因检测***的LAMP方法。

主 题 词:猪链球菌 dnaN LAMP 

学科分类:1001[医学-基础医学] 100101[100101] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.3969/j.issn.1002-2694.2016.06.007

馆 藏 号:203173380...

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