结核分支杆菌异烟肼耐药基因突变微通道电泳检测方法的建立

作     者：王吉 崔振玲 景奉香 金庆辉 赵建龙 胡忠义 徐元森 

作者机构：中国科学院上海微系统与信息技术研究所上海200050 华东师范大学生物系 上海市肺科医院 

基　　金：中国科学院重大项目 (KSCX1 10 6) 

出 版 物：《中华结核和呼吸杂志》 (Chinese Journal of Tuberculosis and Respiratory Diseases)

年 卷 期：2003年第26卷第12期

页      码：785-789页

摘      要：目的　建立一种用微通道电泳芯片分析系统检测结核分支杆菌异烟肼耐药基因突变的方法。方法　以丙烯酰胺及其衍生物的聚合物溶液作为筛分介质 ,溶液中掺入微量的吖啶橙作为荧光标记物 ,对结核分支杆菌的异烟肼耐药相关的katG和inhA基因进行单链构象多态性 (SSCP)分析 ,检测其与耐药性相关的突变。对于突变部位附近没有二级结构的inhA基因 ,设计了特别的引物使扩增产物增加一个能与突变部位配对的区域 ,从而使野生型片段呈现独特的构象。结果　此方法可实现对katG基因野生型片段与 315位密码子突变型片段的区分 ,以及对inhA基因调节序列野生型与突变型片段的区分。 30个临床分离株中的 2 3个耐药株有 2 2个被检出 ,效率达 95 %。结论　微通道电泳方法用于结核杆菌耐药基因突变检测 ,具有快速、灵敏的优点 ,可望将之应用于临床耐药性检测。

主 题 词：结核分支杆菌 异烟肼 耐药基因 基因突变 微通道电泳 检测 

学科分类：1010[医学-医学技术类] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3760/j:issn:1001-0939.2003.12.017

馆 藏 号：203173591...